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[药物试验] 浅析细胞角蛋白(CK18)表达与肿瘤的关系

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开心的小猫 发表于 2020-2-27 09:35:29 | 显示全部楼层 |阅读模式
细胞角蛋白18(Cytokeratin 18,CK18)作为人类细胞角蛋白家族中的一员,是构成肝细胞骨架的主要中间丝蛋白之一,与肝癌、病毒性肝炎和酒精性肝病等明显相关。为了获得足够多的蛋白来研究其生物学功能,可以构建蛋白表达载体进行蛋白表达,一些公司提供蛋白表达服务。关于CK18对癌细胞的作用研究的文献也有很多,如有研究者克隆人细胞角蛋白18基因(CK18)编码区并构建重组真核表达载体pEBFP-CK18,研究其对HepG2肝癌细胞增殖和迁移的影响,发现其对肝癌细胞Hep G2的迁移具有促进作用。此外还有研究发现CK18 与肿瘤侵袭和转移密切相关,可以作为恶行肿瘤辅助诊断的主要依据。

慢性乙型肝炎病毒(HBV)的反复的炎症刺激最终导致肝纤维化 、肝硬化和肝细胞癌的发生 、发展,是威胁人们生命健康的一个重要因素。寻找安全有效的检测慢性HBV 感染后肝硬化和肝细胞癌的方法对慢性 HBV 感染后肝硬化及肝细胞癌的早发现 、早治疗具有重要意义 。CK18不仅具有在肝细胞中保护肝细胞免受外来的各种机械性和非机械性损伤的作用,此外还具有调节细胞周期 、细胞凋亡的作用。

随着对其研究的深入 ,大量的报道显示 CK18 表达水平变化与酒精性肝炎 、非酒精性脂肪肝 、甚至肝细胞癌的发生 、发展具有一定的联系。该蛋白表达水平能够直接反映肝细胞损伤程度,可作为肝脏病变发生 、发展的检测指标。生物标志物检测对于药物研发至关重要,寻找和发现有价值的安全性生物标志物有助于提高药物研发效率和降低药物研发风险。研究发现细胞角蛋白18片段在血液水平中的测定是诊断确认非酒精性脂肪性肝炎NASH可靠的检测方法,又有发表在《美国胃肠病学杂志》上的一篇文章称,来自美国加利福尼亚Rady儿童医院的研究者发现,血清CK18水平是诊断儿童非酒精性脂肪性肝炎的有效生物标志物。

western印迹分析是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法,可检测蛋白质表达。蛋白表达是指用模式生物如细菌、酵母、动物细胞或者植物细胞表达外源基因蛋白的一种分子生物学技术。美迪西提供蛋白表达服务,其拥有多种蛋白表达协同,包括原核蛋白表达系统、酵母蛋白表达系统、昆虫细胞蛋白表达系统(杆状病毒)和哺乳动物细胞蛋白表达系统,具备多种融合技术。

关于CK18表达与乳腺癌关系的研究也有很多,如有研究者通过蛋白质免疫印迹法检测细胞角蛋白18在健康人和乳腺癌患者血清中的表达情况,进一步筛选出CK18高表达的人乳腺癌BT549细胞株,探讨CK18在BT549细胞中的生物学功能及其潜在的分子机制[1]。发现较正常人血清相比,CK18在乳腺癌血清中高表达,且CK18的表达与乳腺癌细胞的转移潜能正相关。还发现人乳腺癌细胞BT549中CK18表达下调,明显抑制细胞增殖、克隆形成能力、降低体外侵袭运动能力,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期于G2/M期。

有研究者观察了CKl8在大肠癌组织的表达,探讨了其在大肠癌发生发展中的作用,发现CKl8在大肠癌组织中的表达水平高于正常组织,但其作用机制尚有待进一步研究[2]。 CKl8是细胞角蛋白的一种,在细胞凋亡过程中被端粒酶特异性裂解的CKl8片段被称为M30片段,是细胞凋亡的标志物;而在细胞坏死时释放的完整CKl8蛋白以及含或不含新表位的蛋白片段称为M65片段,是细胞死亡的标志物,检测血液中CKl8片段的不同形式,有利于探讨其在恶性肿瘤的发生机制中的作用。

肿瘤标志物作为恶性肿瘤早期较为准确诊断依据,受到医学界广泛关注,但因某项肿瘤标志物对于各种恶性肿瘤诊断存在局限性,因此 CK18联合肿瘤标志物检测恶性肿瘤具有更高的诊断价值,能够有效的帮助鉴别诊断恶性肿瘤及良性肿瘤。在药物研发领域,以CK18作为标志物进行研究,具有一定的科研价值。

[1] CK18表达及在人乳腺癌BT439细胞中的功能研究[J].

[2]角蛋白1 8在大肠癌组织的表达及其临床意义[J].


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cry
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