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[药物试验] 药物分析检测方法之超临界流体色谱技术

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  • 2018-7-26 15:32
  • medicilon 发表于 2019-11-12 09:37:38 | 显示全部楼层 |阅读模式
    超临界流体色谱法(SFC),是药物分析检测的一种方法,被广泛用于天然物、药物、表面活性剂等物质的分离和分析中。SFC技术采用超临界流体SF作为流动相,具有检测方式和固定相种类多样的特点,较好地弥补了高效液相色谱和气相色谱的不足,体现出了良好的应用前景。

    1、超临界流体色谱法的工作原理

    超临界流体色谱法SFC对待测物实现分离的主要原理是根据待测物在固定相和流动相两相中的分配系数不同,继而实现对待测物的先后洗脱。不同于传统的GC和HPLC,SFC流动相是一种介于气体和液体之间的超临界流体,兼有液体的高密度和气体的低黏度优势。早期SFC系统由于设备很难控制超临界流体压力,常导致色谱分离性能不稳定,限制了该技术的推广和应用。近年来,随着流体传输设计、稳定和压力控制等技术的创新,SFC系统压力得以精准控制,加之超临界流体具有扩散和传质速率快、黏度低的特点,可以弥补GC和HPLC系统在药物分析检测上的不足。目前已经有包括CO2、N2O、CCl2F2等超过1000中物质被确定了超临界参数,考虑到CO2无毒无害,易于获得且达到超临界所需温度和压力条件较容易实现,目前绝大多数情况下均采用其作为SFC的流动相。

    2、超临界流体色谱法的应用

    超临界流体色谱法在药物分析检测上的应用较为广泛,如在手性药物拆分方面的研究已经取得了较大的进展,在化学药对映异构体拆分、天然产物手性分析以及药物代谢组学研究和药物指纹图谱研究等方面,均获得了较为广泛的应用。也有研究者探讨了超临界流体色谱法应用于两种西药(阿咖酚散和去痛片)以及三种中药(厚朴、吴茱萸和木香)有效成分分析的研究,并对其含量进行测定[1]。

    研究者采用超临界流体色谱法分离测定了阿咖酚散中阿司匹林、咖啡因和对乙酰氨基酚,去痛片中苯巴比妥、非那西丁、咖啡因和氨基比林,厚朴中厚朴酚和和厚朴酚,吴茱萸中吴茱萸次碱和吴茱萸碱,木香中去氢木香内酯和木香内酯的研究。实验方法为采用单因素试验法,以厚朴、吴茱萸和木香中主要有效成分的含量为评价指标,考察超声提取法和微波提取法中温度、时间、料液比对提取效果的影响,对提取方法的总体效果进行比较。使用超临界流体色谱仪,以加入适量甲醇作改性剂的超临界CO2为流动相,考察流动相组成、温度、压力等对待侧组分分离的影响,并以优化的色谱条件测定阿咖酚散、去痛片以及厚朴、吴茱萸、木香中有效成分的含量。

    该研究首次采用超临界流体色谱法分离测定阿咖酚散、去痛片以及厚朴、吴茱萸、木香中的主要有效成分,方法简便快速、条件温和。同时,该研究所建立的含量测定方法,具有分离效果佳、系统适应性好、结果稳定等特点,可为上述五种药物(药材)的质量控制方法提供参考。

    高效液相色谱法、气相色谱法都是药物分析检测的方法,与这些方法相比,SFC药物分析方法有其独特的优点。

    3、SFC与其他色谱法的比较

    (1)SFC与高效液相色谱法比较

    实验证明SFC法的柱效一般比HPLC法要高:当平均线速度为0.6cm.S-1时,SFC法的柱效可为HPLC法的3倍左右,在最小板高下载气线速度是4倍左右;因此SFC法的分离时间也比HPLC法短。这是由于流体的低粘度使其流动速度比HPLC法快,有利于缩短分离时间。

    (2)与气相色谱法比较

    出于流体的扩散系数与粘度介于气体和液体之间,因此SFC的谱带展宽比GC要小;另外,SFC中流动相的作用类似LC中流动相,流体作流动相不仅载带溶质移动,而且与溶质会产生相互作用力,参与选择竞争。还有,如果把溶质分子溶解在超临界流体看作类似于挥发,这样,大分子物质的分压很大,因此可应用比GC低得多的温度,实现对大分子物质、热不稳定性化合物、高聚物等的有效分离。

    (3)应用范围的比较

    SFC比起GC法测定相对分子质量的范围要大出好几个数量级,基本与LC法相当。当然,尺寸排阻色谱法(SEC)所测分子质量范围是所有色谱法中最大的。

    目前随着SFC技术的发展,其在手性药物拆分和高通量药物分离分析中的价值也越来越大。快速、高效、灵敏和环保的SFC及其联用技术在药物分析检测上的应用将会越来越广泛,其发展前景也会越来越好。

    [1] 超临界流体色谱法应用于几种药物有效成分分析的研究[J].

    临床药师网,伴你一起成长!微信公众号:clinphar2007

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    cry
    还木有人打赏~
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